การสกัดแยกเฮปารินจากเนื้อเยื่อสัตว์ : รายงานผลการวิจัยฉบับสมบูรณ์

Study show that the most suitable tissue source for heparin extraction is porecine lung. The extraction and purification processed of heparin from porcine lung consist of 1) tissue autolysis 2) tissue disgestion by Neutrase enzyme 3) precipitation of impurities with trichloroacetic acid 4) removal o...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Main Author: ศุภศร วนิชเวชารุ่งเรือง
Format: Research Report
Language:Thai
Published: สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพและวิศวกรรมพันธุศาสตร์ จุฬาลงกรณ์์มหาวิทยาลัย 1999
Subjects:
Online Access:https://digiverse.chula.ac.th/Info/item/dc:15444
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Institution: Chulalongkorn University
Language: Thai
id 15444
record_format dspace
spelling 154442024-02-21T06:01:01Z https://digiverse.chula.ac.th/Info/item/dc:15444 Study show that the most suitable tissue source for heparin extraction is porecine lung. The extraction and purification processed of heparin from porcine lung consist of 1) tissue autolysis 2) tissue disgestion by Neutrase enzyme 3) precipitation of impurities with trichloroacetic acid 4) removal of molecules weight of less than 3,000 daltons by ultrafiltration 5) fractional precipitation of contaminating glycosaminoglycans and heparin with aqueous ethanol solution and 6) further purification of the obtained heparin by anion exchange chromatography. It was found that the Anti Factor Xa blood anticoagulant activity of the purified heparin was 143.21 unit/mg. By using these extraction and purification processes, one kilogram (wet weight) of the porcing lung tissue yields 18.20 milligrams of high purify heparin (2,606.42 units). Structural analyses of the obtained heparin were done by nuclear magnetic resonance spectroscopy and elemental analysis. It was found that heparin preparation had 4.63%N 48.86%C 9.31%H and 37.20%S and molecular weight of 4,500 daltons estimated by size exclusion chromatography. จากการศึกษาปัจจัยต่าง ๆ พบว่า เนื้อเยื่อสัตว์ที่เหมาะสมจะนำมาสกัดแยกเฮปาริน ได้แก่ เนื้อเยื่อปอดสุกร กระบวนการสกัดเฮปารินจากเนื้อเยื่อปอดสุกร ประกอบด้วย 1) การออโตไลซิสเนื้อเยื่อ 2) การย่อยเนื้อเยื่อด้วยเอนไซม์นิวเทรส 3) การตกตะกอนสารเจือปนด้วยกรดไตรคลอโรอะซิติค 4) การกำจัดสารที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำกว่า 3,000 ดาลตัน ด้วยวิธีอัลทราฟิวเทรชัน 5) การตกตะกอนลำดับส่วนไกลโคอะมิโนไกลแคนประเภทต่าง ๆ ที่เจือปน รวมทั้งเฮปารินด้วยสารละลายเอธานอลในน้ำ และ 6) การทำเฮปารินที่สกัดได้ให้บริสุทธิ์ยิ่งขึ้น โดยวิธีแอนไอออนเอกซ์เซนจ์โครมาโตกราฟี พบว่า เฮปารินที่ได้มีค่าต่อต้านการแข็งตัวของเลือดแบบแอนตีแฟกเตอร์เทนเอ (Anti Factor Xa) เท่ากับ 143.21 ยูนิตต่อมิลลิกรัม ด้วยกระบวนการนี้สามารถสกัดเฮปารินได้ 18.20 มิลลิกรัม (2,606.42 ยูนิต) จากเนื้อเยื่อปอดสุกร 1 กิโลกรม (น้ำหนักเปียก) นอกจากนั้นได้ทำการตรวจสอบโครงสร้างทางเคมีของเฮปารินที่สกัดได้ โดยวิธีนิวเคลียร์แมคเนติคเรโซแนนซ์สเปกโตรสโคปี และวิเคราะห์อัตราส่วนองค์ประกอบธาตุ พบว่า มีไนโตรเจน 4.63% คาร์บอน 48.86% ไฮโดรเจน 9.31% และซัลเฟอร์ 37.20% และจากการหาน้ำหนักโมเลกุลด้วยวิธีไซส์เอกซ์คลูชันโครมาโตกราฟี พบว่า เฮปารินที่ได้มีน้ำหนักโมเลกุล 4,500 ดาลตัน 85 pages ทุนอุดหนุนจากงบประมาณแผ่นดิน ประจำปีงบประมาณ 2538-2539 Research Report ©สถาบันวิจัยเทคโนโลยีชีวภาพและวิศวกรรมพันธุศาสตร์ จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย 10.58837/CHULA.RES.1999.80 tha ศุภศร วนิชเวชารุ่งเรือง การสกัดแยกเฮปารินจากเนื้อเยื่อสัตว์ : รายงานผลการวิจัยฉบับสมบูรณ์ สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพและวิศวกรรมพันธุศาสตร์ จุฬาลงกรณ์์มหาวิทยาลัย 1999 1999 เฮปาริน เซลล์และเนื้อเยื่อสัตว์ https://digiverse.chula.ac.th/digital/file_upload/biblio/cover/15444.jpg
institution Chulalongkorn University
building Chulalongkorn University Library
continent Asia
country Thailand
Thailand
content_provider Chulalongkorn University Library
collection Chulalongkorn University Intellectual Repository
language Thai
topic เฮปาริน
เซลล์และเนื้อเยื่อสัตว์
spellingShingle เฮปาริน
เซลล์และเนื้อเยื่อสัตว์
ศุภศร วนิชเวชารุ่งเรือง
การสกัดแยกเฮปารินจากเนื้อเยื่อสัตว์ : รายงานผลการวิจัยฉบับสมบูรณ์
description Study show that the most suitable tissue source for heparin extraction is porecine lung. The extraction and purification processed of heparin from porcine lung consist of 1) tissue autolysis 2) tissue disgestion by Neutrase enzyme 3) precipitation of impurities with trichloroacetic acid 4) removal of molecules weight of less than 3,000 daltons by ultrafiltration 5) fractional precipitation of contaminating glycosaminoglycans and heparin with aqueous ethanol solution and 6) further purification of the obtained heparin by anion exchange chromatography. It was found that the Anti Factor Xa blood anticoagulant activity of the purified heparin was 143.21 unit/mg. By using these extraction and purification processes, one kilogram (wet weight) of the porcing lung tissue yields 18.20 milligrams of high purify heparin (2,606.42 units). Structural analyses of the obtained heparin were done by nuclear magnetic resonance spectroscopy and elemental analysis. It was found that heparin preparation had 4.63%N 48.86%C 9.31%H and 37.20%S and molecular weight of 4,500 daltons estimated by size exclusion chromatography.
format Research Report
author ศุภศร วนิชเวชารุ่งเรือง
author_facet ศุภศร วนิชเวชารุ่งเรือง
author_sort ศุภศร วนิชเวชารุ่งเรือง
title การสกัดแยกเฮปารินจากเนื้อเยื่อสัตว์ : รายงานผลการวิจัยฉบับสมบูรณ์
title_short การสกัดแยกเฮปารินจากเนื้อเยื่อสัตว์ : รายงานผลการวิจัยฉบับสมบูรณ์
title_full การสกัดแยกเฮปารินจากเนื้อเยื่อสัตว์ : รายงานผลการวิจัยฉบับสมบูรณ์
title_fullStr การสกัดแยกเฮปารินจากเนื้อเยื่อสัตว์ : รายงานผลการวิจัยฉบับสมบูรณ์
title_full_unstemmed การสกัดแยกเฮปารินจากเนื้อเยื่อสัตว์ : รายงานผลการวิจัยฉบับสมบูรณ์
title_sort การสกัดแยกเฮปารินจากเนื้อเยื่อสัตว์ : รายงานผลการวิจัยฉบับสมบูรณ์
publisher สถาบันเทคโนโลยีชีวภาพและวิศวกรรมพันธุศาสตร์ จุฬาลงกรณ์์มหาวิทยาลัย
publishDate 1999
url https://digiverse.chula.ac.th/Info/item/dc:15444
_version_ 1831169143940841472